Skip to main content
Login | Suomeksi | På svenska | In English

Browsing by Subject "estrogen"

Sort by: Order: Results:

  • Kallionpää, Roope (2014)
    Estrogens are female sex hormones that have genotoxic and proliferation-enhancing effects in cells. Life-time exposure to estrogens is linked to the risk of several cancers. Estrone is only a weak agonist of estrogen receptor but it serves as a precursor for biosynthesis of 17β-estradiol, 16α-hydroxyestrone and catechol estrogens. While 16α-hydroxyestrone has relatively weak affinity for estrogen receptor, it has prolonged effect due to covalent binding to the receptor. UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) are phase II metabolic enzymes that conjugate estrogens with glucuronic acid to render them more watersoluble. Polymorphisms in UGT genes have been linked to excretion of steroids and risk of some cancers. Generally, subfamily UGT1A enzymes conjugate the 3-hydroxyls of estrogens, while the activity of subfamily UGT2B is directed towards 16- and 17-hydroxyls. Previous results on estrone glucuronidation are incomplete and conflicting, while glucuronidation of 16α-hydroxyestrone has not been systematically studied. The aim of this study was to identify UGTs active in the glucuronidation of estrone and 16α-hydroxyestrone and to further examine the glucuronidation kinetics of the active UGTs. Also the effects of bovine serum albumin (BSA), dimethyl sulfoxide (DMSO) and mutations of UGT1A10F90 and UGT1A10F93 on glucuronidation activity were examined. Activity assays were conducted using recombinant enzymes as well as human liver and intestinal microsomes. Resulting glucuronides were analyzed using high performance liquid chromatography and quantified based on their UV absorbance. UGT1A3, UGT1A10 and UGT2A1 showed the highest activity toward estrone glucuronidation, while UGT1A10, UGT2A1 and UGT2B7 were the most efficient UGTs conjugating 16α-hydroxyestrone. UGT1A10 had the highest Vmax in the glucuronidation of both substrates, although it conjugated estrone at a higher rate than 16α-hydroxyestrone. UGT1A10F93 was shown to have a role in the different glucuronidation activities of UGT1A10 toward estrone and 16α-hydroxyestrone. Affinity of 16α-hydroxyestrone was highest for UGT2B7, while UGT2B17 conjugated 16α-hydroxyestrone relatively slowly. The results confirm earlier observations of the preference of UGT2B7 for α-configured hydroxyls while UGT2B17 favors β-configuration. UGT2A1 showed no strict regioselectivity but had a relatively weak affinity for both substrates. DMSO was found to decrease UGT activity. However, its presence is necessary to solubilize lipophilic substrates. DMSO concentration has to be kept constant to produce comparable data for, for example, kinetic studies. BSA was found to alter especially the kinetics of UGT2A1. BSA also seemed to have solubility-enhancing effect.
  • Nurminen, Tanjamaarit (University of HelsinkiHelsingin yliopistoHelsingfors universitet, 2008)
    Virtsanpidätyskyvyttömyys on passiivista virtsan ulosvalumista erityisesti koiran ollessa makuuasennossa. Haittana pitkään jatkuvalle virtsanpidätyskyvyttömyydelle on toistuvat virtsatietulehdukset, ihon vaurioituminen sekä hygieeniset syyt. Tutkimuksissa, joissa tutkimuskohteena on ollut steriloitujen narttukoirien virtsanpidätyskyvyttömyys on sairauden esiintyvyydeksi saatu noin 20 %. Tämän retrospektiivisen tutkimuksen tarkoitus oli selvittää virtsanpidätyskyvyttömyyttä suomalaisessa koirapopulaatiossa sillä vastaavanlaista tutkimusta ei ole aikaisemmin tehty. Tutkimusaineistona oli Yliopistollisessa Eläinsairaalassa vuonna 1999 sterilisaatioleikkauksessa olleet narttukoirat. Potilaskortistosta kerättiin koiran nimi, rotu sekä syntymä- ja kuolinvuosi, jos sellainen oli tiedossa. Myös koiran omistajan osoitetiedot kirjattiin ylös. Jokainen potilas sai YES:n potilasnumeron lisäksi tutkimuksessa käytettävän diaarinumeron. Vuonna 2004 kevään ja syksyn aikana koirien omistajille lähetettiin kyselykaavake, jossa tiedusteltiin koiran painoa ja onko koiralla ollut ongelmia virtsanpidätyskyvyttömyydessä. Mikäli virtsanpidätyskyvyttömyyttä esiintyi, niin omistajalta kysyttiin oireiden alkamisajan kohtaa sekä mahdollista lääkitystä ja sen tehoa. Lisäksi tiedusteltiin oliko potilaalla ollut virtsatie- ja/tai -rakontulehduksia. Potilaskortistosta saatiin 275:n koiran tiedot. Yhdeksän potilaista oli kuollut muutaman kuukauden kuluttua leikkauksesta, joten niiden omistajille ei lähetetty kyselykaavaketta. Lisäksi aineistoon oli vahingossa mukaan tullut yksi kissa ja yksi löytökoira, jonka uutta omistajaa ei tiedetty. Kyselykaavakkeet lähettiin 264:n koiran omistajalle. Jokaisen potilaan paino, rotu ja tieto siitä, sairastaako potilas virtsanpidätyskyvyttömyyttä vai ei sekä milloin oireet olivat alkaneet kirjattiin ja taulukoitiin Microsoft Excel-taulukkolaskentaohjelmaan ja Microsoft-tekstinkäsittelyohjelmaan. Tutkimuksen tulokset: Kaavakkeita palautettiin täytettynä 144 kappaletta. 34 kirjettä palautettiin avaamattomana, sillä niiden vastaanottajaa ei tavoitettu. Epäselvien vastauksien vuoksi tutkimuksesta poistettiin kolmen koiran tiedot, joten jäljelle jäi 141 potilasta eli 53,4 % tutkimukseen valikoiduista koirista. Koska tutkimuksessa ei ollut mukana verrokkiryhmää eli tietoa siitä paljonko kaikista narttukoirista sairastuu virtsanpidätyskyvyttömyyteen. Verrokkiryhmänä käytettiin kirjallisuudesta saatua arvoa ( 1% edinburghilainen aineisto). Binomitesti tehtiin SPSS-tilastotiedeohjelmalla. Nollahypoteesin mukaan oirehtijoiden osuus YES:n aineistossa on korkeintaan 1% ja vaihtoehtohypoteesin mukaan oirehtijoita on YES:n aineistossa yli 1%. Koska SPSS antaa p-arvoksi << 0,05 , jonka seurauksena nollahypoteesi hylätään ja vaihtoehtohypoteesi astuu voimaan. 141 koirasta 27 sairasti virtsanpidätyskyvyttömyyttä eli 19,1% eli sterilisaatio altistaa virtsanpidätyskyvyttömyydelle vaihtoehtohypoteesin mukaan. Tutkimus selvitti myös sairastivatko tutkimukseen osallistuneet koirat virtsatietulehduksia. 5,7 %:lla koirista oli ollut virtsatietulehduksia (16kpl). Näistä puolella oli myös ongelmia virtsanpidätyskyvyn kanssa, josta seuraa että 26,9 % virtsanpidätyskyvyttömistä sairasti myös virtsatietulehduksia. Kirjallisuusosuus käsittelee muualla tehtyjä steriloitujen narttukoirien virtsanpidätyskyvyttömyyteen liittyviä tutkimuksia sekä sen etiologiaa, alttiutta ja hoitomuotoja.