Evaluation of the antitumor efficacy of peptide-coated conditionally replicating adenovirus (PeptiCRAd)

Onkolyyttisiä viruksia on tutkittu laajasti syövän hoidossa. Ne ovat geneettisesti muokattuja viruksia, jotka pystyvät selektiivisesti infektoimaan ja tappamaan syöpäsoluja vahingoittamatta normaaleja soluja. Adenovirukset ovat yleisimmin käytettyjä viruksia geeniterapiassa ja näiden virusten muunnoksia arvioidaan useissa kliinisissä kokeissa tällä hetkellä. Onkolyyttisten adenovirusten syöpäsoluja tappavat ominaisuudet on tiedetty jo pitkään. Tämän lisäksi tiedetään, että ne voivat aktivoida immuunijärjestelmää. Jotta saavutettaisiin selektiivisempiä ja tehokkaampia kasvainta tuhoavia vaikutuksia, useita muunnelmia onkolyyttisistä adenoviruksista on tutkittu. Harjoitteluni aikana olin mukana kehittämässä uutta syöpärokotemallia, joka perustuu peptidillä päällystettyyn, ehdollisesti replikoituvaan adenovirukseen (PeptiCRAd). PeptiCRAd:n teknologia koostuu serotyypin 5 adenoviruksista, jotka päällystetään kasvaimesta peräisin olevilla peptideillä. Työn tavoitteena oli arvioida PeptiCRAd:n tehoa kasvainta vastaan. PeptiCRAd:n soluja tappavaa tehoa tutkittiin in vitro käyttämällä ihmisen adenokarsinooman solulinjaa, A549. Soluja tappavia vaikutuksia tutkittiin käsittelemällä soluja sekä PeptiCRAd:lla että pelkästään Ad5Δ24-CpG- viruksella ja polyK-SIINFEKL- peptidillä. Solujen viabiliteetti tutkittiin käyttämällä MTS reagenssia ja solujen määrä määritettiin spektrofotometrisesti. Kasvainta tuhoavia vaikutuksia tutkittiin myös in vivo normaalin immuunijärjestelmän omaavilla C57BL/6- hiirillä, jotka kantoivat B16-OVA melanooman kasvaimia. Hiirten kasvaimia hoidettiin Ad5Δ24-CpG- viruksella, SIINFEKL- peptidillä tai PeptiCRAd:lla. Kasvainta tuhoavien vaikutusten tutkimista varten, kasvaimen kokoa seurattiin hoitojen jälkeen. Tässä työssä osoitin, että PeptiCRAd:lla ja Ad5Δ24-CpG- viruksella molemmilla on kasvainsoluja tappavia vaikutuksia in vitro A549- syöpäsoluja kohtaan. Ad5Δ24-CpG- virus osoitti in vitro merkittävästi parempia soluja tappavia vaikutuksia suuremmilla pitoisuuksilla kuin PeptiCRAd. In vivo PeptiCRAd osoitti selkeimmin kasvainta tuhoavia vaikutuksia vaikuttamalla muodostuneiden kasvainten kasvuun. Kokeen lopussa kasvainten koko oli merkittävästi pienin PeptiCRAd ryhmässä.