Browsing by Author "Yrjölä, Ville"

HIV-epidemia on maailmanlaajuinen terveysongelma ja se koskettaa WHO:n arvion mukaan suoraan lähes neljänkymmenen miljoonan ihmisen elämää. Hankinnallisen immuunikadon aiheuttajana HI-virus on tunnettu 80-luvun alkupuolelta lähtien, mutta infektion tehokas hoito on osoittautunut haastavaksi tehtäväksi. Nykyaikainen antiretroviraalinen lääkitys laskee parhaimmillaan virustasot potilaan veressä mittaamattoman matalaksi ja estää sairauden etenemisen AIDS-vaiheeseen sekä tarttumisen eteenpäin. Tästä huolimatta sairauteen tiedetään liittyvän myös muita terveysongelmia, kuten tiettyjen syöpäsairauksien ilmaantumista. Merkittävänä mekanismina infektion aiheuttaman sairastavuuden taustalla, lääkityksestä huolimatta, ajatellaan olevan krooninen immuuniaktivaatio, johon nykyaikainen lääkitys ei näytä tarjoavan riittävää apua. Matalista virustasoista huolimatta potilaiden elimistöstä voidaan todeta lisääntyneeseen ja poikkeavaan immuunijärjestelmän toimintaan viittaavia merkkejä. Tämän tutkimuksen tarkoitus oli karakterisoida Src-perheeseen kuuluvan tyrosiinikinaasi Hck:n inhibiittorimolekyylien RM-1-87 ja RM-1-183 toimintaa elävässä solumallissa. Hck:n liiallinen aktiivisuus näyttelee roolia mm. HIV-infektioon liittyvässä immuuniaktivaatiossa sekä lukuisissa syöpäsairauksissa. Tutkimuksen kokeellinen osuus jakautui kahteen vaiheeseen: tehokkaan inhibiittorikonsentraation selvittäminen ja inhibiittorien spesifisyyden mittaaminen verrattuna muihin Src-perheen tyrosiinikinaaseihin. Tutkimuksessa käytettiin solumallina HEK 293T -linjan soluja, joihin transfektoitiin kalsiumfosfaattimenetelmää hyödyntäen tutkittava tyrosiinikinaasi, tämän substraatti paxilliini sekä Nef, joka toimi transfektiokontrollina. Transfektion jälkeen soluja inkuboitiin inhibiittoria sisältävässä elatusliuoksessa. Tutkituilla inhibiittorimolekyyleillä ei näyttänyt olevan toivottua spesifisyyttä Hck:ta kohtaan muihin Src-perheen kinaaseihin verrattuna, joskin jatkoselvittelyssä Nef:n läsnäolo näytti vaikuttavan inhibiittorin tehokkuuteen. (201)