Browsing by Author "Tervala, Marjukka"

Blefaro-cheilo-dontinen syndrooma (BCDS) on harvinainen sairaus, jonka ilmiasuun kuuluu kolme pääpiirrettä: huuli-/ suulakihalkiot, ektodermaaliset dysplasiamuutokset ja silmäluomien epämuodostumat. BCDS on yhdistetty mutaatioihin mm. CDH1-geenissä, joka koodaa epiteelissä ja yksilönkehityksen eri vaiheissa ilmentyvää solukalvon adheesiomolekyyli E-kadheriinia. Aiemmin tutkimusryhmämme, joka tutkii kallon ja kasvojen alueen kehitystä ja epämuodostumia Helsingin yliopistossa, oli tunnistanut kaksi uutta E-kadheriinimutaatiota suomalaisten BCDS-potilaiden E-kadheriinia koodaavissa geeneissä. Tämän tutkielman päämääränä oli päästä lähemmäs niitä syitä, jotka ovat kyseisen syndrooman taudinkuvan taustalla. Tähän päämäärään pyrittiin pääsemään tutkimalla ekspressioeroja ja tekemällä funktionaalisia kokeita CHO-soluilla, jotka transfektoitiin sekä edellä mainituilla E-kadheriinin mutanttimuotoja ekspressoivilla plasmideilla, joita kutsutaan nyt tässä mutanttisoluiksi, että villityypin E-kadheriinia ekspressoivilla plasmideilla, joita kutsutaan tässä villityypin soluiksi. Tutkimustulokset saatiin taltioimalla ja analysoimalla data IncuCyte ZOOM -livesolukuvantamisteknologian avulla. Kokeissa havaittiin transfektoiduissa soluissa mutanttiproteiinien heikompi ekspressio villityypin E-kadheriiniin verrattuna. Toisaalta funktionaaliset kokeet eivät antaneet viitettä kohonneesta migraatiokyvystä mutanttisoluilla villityypin soluihin verrattuna, mutta proliferaatioerot näyttivät, kuten hypoteesi ennusti, että mutanttisoluilla oli hieman parempi proliferaatiokyky kuin villityypin soluilla. Lopputulemana saadut tulokset viittaavat kuitenkin siihen, että BCDS-fenotyyppi johtunee jostain muusta muuttuneen aminohapposekvenssin aiheuttamasta proteiinin muuttuneesta toiminnasta kuin hieman kohonneesta proliferaatikyvystä tai hieman alentuneesta ekspressiotasosta mutanttisoluilla villityypin soluihin nähden.