Browsing by discipline "Molekyylilääketiede"

Tausta: Adenomyoomat ovat paikallisia kohdun kyhmyjä, joissa kohdun limakalvon rauhaset tunkeutuvat lihaskerrokseen. Niiden molekulaarinen tausta ei ole tunnettu. Hyvänlaatuisten kohdun sileälihaskasvainten, leiomyoomien, tärkeimpiä geneettisiä muutoksia ovat MED12-mutaatiot, HMGA2:n yli-ilmentyminen ja FH:n inaktivaatio. Tässä tutkimuksessa etsimme näitä samoja muutoksia adenomyoomista. Menetelmät: Keräsimme tutkimukseen Helsingin yliopiston patologian laitoksen arkistosta 21 potilaan formaliiniin säilötyt adenomyoomanäytteet (n=21). DNA:n eristyksen jälkeen MED12 eksonien 1 ja 2 mutaatiot seulottiin suoralla sekvensoinnilla. HMGA2:n ja FH:n ilmentymistä analysoitiin immunohistokemiallisen menetelmän avulla. 2SC-vasta-aineella voitiin tunnistaa sukkinoitujen proteiinien kertymistä soluihin, mikä viittasi epäsuorasti FH:n inaktivaatioon. FH:n inaktivaatio varmistettiin FH-immunovärjäyksellä ja FH:n koodaavan alueen sekvensoinnilla. Tulokset: Löysimme kahdesta näytteestä (2/21, 9,5%) MED12-mutaation c.131G>A, p.G44D, joka on yleisin leiomyoomissa esiintyvä mutaatio. Löysimme yhdestä näytteestä 2SC-immunovärjäyksen avulla FH:n inaktivaation, joka paljastui FH-geenin lukukehystä muuttavaksi c.911delC, p.P304fs mutaatioksi. Samalta potilaalta löytyi kohdusta myös erillinen leiomyooma. Molemmissa kasvaimissa havaittiin sama mutaatio ja mutanttialleeli oli sekvenssissä enimmäkseen esillä viitaten myös heterotsygotian menetykseen. Immunovärjäyksessä kasvainten FH:n ilmentyminen oli alentunutta. Potilaalla oli sairaushistorian perusteella ollut useita leiomyoomia, mikä yhdessä näytteiden molekulaarisen taustan kanssa viittaa tuumoreille altistavaan HLRCC oireyhtymään. HMGA2:n ilmentyminen oli normaalia kaikissa näytteissä. Pohdinta: MED12-mutaatio löytyy pienestä osasta adenomyoomia. Myös FH:n molempien alleelien inaktivaatio voi johtaa adenomyoomien syntyyn, joten HLRCC oireyhtymä voi mahdollisesti altistaa adenomyoomille. Tulevaisuudessa tarkemmat molekyytitason analyysit ovat tarpeen adenomyoomien patogeneesin selvittämiseksi. (207 sanaa)