Browsing by discipline "Pharmacology"
Now showing items 1-20 of 22
-
(2017)Monissa sairauksissa suoliston seinässä voidaan havaita tulehdus, läpäisevyyden kasvu ja mikrobiston muutoksia verrattuna terveisiin verrokkeihin. Tästä syystä suoliston mikrobiston muokkaamisella ja anti-inflammatorisilla bakteerilajeilla on potentiaalia kyseisten sairauksien hoidossa sekä preventiossa. Tulehduksen hoidossa tehokkaaksi menetelmäksi on osoittautunut mm. ulosteensiirrot, mutta sen anti-inflammatorisesta vasteesta vastaavat mekanismit ovat vielä osittain epäselviä. Tämän tutkielman kirjallisuuskatsauksessa tarkasteltiin suoliston mikrobiston ja läpäisevyyden häiriöiden vaikutuksia terveyteen ja erityisesti nivelreumaan. Nivelreumapotilailla on tyypillisesti kohonnut suoliston läpäisevyys, mutta sen merkitys sairauden etenemisessä ja patogeneesissä on vielä tuntematon. Suoliston mikrobiston häiriöt ja läpäisevyyden muutokset saattavat aiheuttaa immuunireaktion, joka voi johtaa nivelen rakenteisiin kohdistuvan autoimmuniteetin puhkeamiseen. Kokeellisessa osiossa tutkittiin suolistosta eristettyjen potentiaalisesti anti-inflammatoristen Propioni acnes –bakteerin ja toistaiseksi tuntemattoman linjan (27cc1) bakteerin vaikutuksia suoliston läpäisevyyteen. Koe suoritettiin Caco2-enterosyyttisolulinjalla ja sen muodostaman epiteelin läpäisevyyttä arvioitiin TER (transepithelial electrical resistance) -mittauksilla. Valituilla bakteereilla ei havaittu kokeissa merkittävää vaikutusta epiteelin läpäisevyyteen in vitro.
-
(2016)This thesis work was carried out in Biology Section of Experimental Therapeutics Programme in Spanish National Cancer Research Center in Madrid. The aim of this work was to carry out characterization of ADME profile of novel protein kinase inhibitors synthesized by the Medicinal Chemistry Section of Experimental Therapeutics Programme. ADME refers to absorption, distribution, metabolism and excretion. ADME screening provides crucial information when choosing new chemical entities (NCEs) and lead compounds with desirable properties for further development and for clinical studies. ADME screening is carried out in the early discovery phase in order to avoid costly failures in the later stages. The protein kinase inhibitors used in this work were designed against three different targets. However, the targets cannot be disclosed in this work due to confidentiality reasons and thus they will be referred to as X, Y, and Z. The ADME characterization was performed in a high-throughput format to screen fast compounds with desired properties. To carry out ADME characterization for the novel compounds, several in vitro assays and in vivo pharmacokinetic studies were carried out. The work was started by setting up an LC-MS/MS detection method for each compound. All in all, LC-MS/MS detection method was set up for 63 new compounds. The detection method was used to analyze the results of different in vitro and in vivo studies. In vitro assays included kinetic solubility assay, parallel artificial membrane permeability assay (PAMPA), microsomal metabolic stability assay, plasma protein binding assay, and solubility in biological fluids. The solubility in biological fluids assay was performed only for the two compounds that were selected for the pharmacokinetic (PK) study. Pharmacokinetic properties of the compounds selected for the pharmacokinetic study using the Balb/C mice were further analyzed by their pharmacokinetic parameters. These parameters were calculated by applying non-compartmental model in the WinNonlin software. One compound, ETP-871, showed promising results in the pharmacokinetic study. Another compound ETP-827 was cleared too fast from the body. Too fast excretion is undesirable since low plasma concentration of the drug is insufficient to reach the therapeutic effect. For the compound ETP-827 a new PK study with higher dose was carried out. Due to the confidentiality reasons, these further studies are not presented in this work.
-
Effect of the PPARα-activator gemfibrozil on whole blood drug transporter gene expression in humans (2014)Gemfibrozil is a fibric acid derivative used in the treatment of dyslipidemia. It activates peroxisome proliferator activated receptor α (PPARα) and alters lipoprotein metabolism gene expression. PPARα may also regulate the expression of drug disposition genes (e.g., CYP3A4). The aim of this study was to investigate possible effects of gemfibrozil on drug transporter gene expression in human whole blood. In a randomized crossover study, 10 healthy volunteers took 600 mg gemfibrozil or placebo twice daily for 6 days (Filppula et al. 2013). On the morning of day 3, a venous blood RNA sample was collected from each participant into a PaxGene® tube. The expression of 18 ABC, 24 SLC and 10 SLCO transporters was investigated using reverse transcription quantitative real-time PCR (RT-qPCR) with OpenArray® technology on a QuantStudio™ 12 K Flex Real-Time PCR system (Life Technologies, Paisley, UK). FPGS, TRAP1, DECR1 and PPIB served as reference genes. A total of 31 transporters, including 15 ABC transporters, 13 SLC transporters and 3 SLCO transporters were significantly expressed in whole blood during the placebo phase. Gemfibrozil appeared to alter the expression of three transporters. The expression of SLCO3A1 was increased by 34% by gemfibrozil (P=0.004), but gemfibrozil reduced the expression of ABCG2 and ABCC3 by 31% (P=0.018) and 50% (P=0.045), respectively. However, none of the differences remained statistically significant after correction for multiple testing. In conclusion, these data suggest that gemfibrozil might alter the gene expression of certain drug transporters in human blood.
-
(2009)Tutkimuksessa tutkittiin NR4A-ryhmän tumareseptoreiden määrän muutosta maksakudoksessa energiarajoituksen ja resveratrolin vaikutuksista. Tutkimus tehtiin hiirillä ja laboratoriomenetelmänä oli Western Blot. NR4A-tumareseptoriryhmään kuuluvat Nur77, Nurr1 ja NOR-1. Ne säätelevät useissa kudoksissa useita eri solunsisäisiä tapahtumia. Maksassa ne säätelevät eri metabolisia prosesseja, etenkin glukoneogeneesiä ja lipogeneesiä. Lipogeneesillä on merkitystä rasvamaksan syntyyn ja glukoneogeneesillä taas on merkitystä veren sokeripitoisuudelle ja lisääntynyt glukoneogeneesi on merkittävä tekijä Tyypin 2 Diabetes Mellitus-taudissa esiintyvän hyperglykemian kannalta. Saamiemme tulosten mukaan Nur77:n määrä nousee selvästi energiarajoituksen vaikutuksesta runsasrasvaista ravintoa syöneeseen kontrolliryhmään verrattuna. NOR-1:n määrä nousee selvästi suurella (4 g/kg) rehupitoisuudella resveratrolia. Nurr1:n tuloksissa ei löytynyt statistisesti merkittäviä eroja ryhmien välillä. Tulkintani mukaan resveratroli on potentiaalinen maksan rasvoittumisen estäjä ja glukoneogeneesiä lisäävä aine stimuloimalla NR4A-ryhmän tumareseptoreita maksassa. Täten resveratroli ei ainakaan hepatosyyttien NR4A-reitin kannalta selitä sitä tosiasiaa että resveratroli vähentää diabeettista hyperglykemiaa.
-
(2016)γ-Aminobutyric acid (GABA) is the main inhibitory neurotransmitter in the central nervous system. It acts upon two classes of GABA receptors: ionotropic and metabotropic. The GABAB receptor is a metabotropic G protein-coupled receptor (GPCR) that associates with the Gαi/o family of G-proteins causing inhibitory actions via the inhibition of adenylyl cyclase. Baclofen, a GABAB receptor agonist, has recently been found to be a potential treatment of alcohol addiction by suppressing the drug craving stage of the addiction cycle. However, the adverse side effects of baclofen including sedation and hypothermia, as well as its narrow therapeutic index, have limited its clinical use in the treatment. Positive allosteric modulators may be the answer to providing more selective and personalised treatments. These modulators function by enhancing or attenuating the response activated by the agonists, while having little inherent intrinsic activity. Therefore, they are less likely to cause adverse effects while also reducing the dosage of the agonistic drugs, essentially diminishing the adverse effects of the agonist. Mu-opioid receptor antagonists have been available for the treatment of alcohol and drug addiction for over 20 years. Preclinical studies have found that a continuous infusion of naltrexone has led to the increased consumption of ethanol after the drug has been metabolised out of the system. Furthermore, nalmefene, a specific and potent opioid antagonist has been developed and shown to have therapeutic advantages over naltrexone. Our study wanted to compare sex-specific brain-wide distribution of G-protein coupling after activation of GABAB receptors by baclofen and the positive allosteric modulator RacBHFF in ten RccHan®:WIST albino male and female rats, and compare species differences between the rats and five wildtype C57BL/6J male mice. Furthermore, we wanted to determine whether G-protein coupling of GABAB receptors is altered in sixty female AA (Alko, Alcohol) alcohol-preferring rats with and without various modes of treatments with naltrexone and nalmefene (7 daily injections or 7-day continuous infusion using osmotic minipumps at equipotent low and moderate doses). We did this using [35S]GTPγS autoradiography as means to measure the efficacy and potency of different concentrations of RacBHFF combined with 30 µM baclofen. Our results showed that RacBHFF does have positive allosteric activity on baclofen-stimulated GABAB receptor-mediated G-protein activation and the extent of it was regionally dependent. RacBHFF had greatest efficacy in the cerebellum, cortex and thalamus in all the samples studied. Furthermore, 30 µM baclofen alone and 10 µM RacBHFF alone are not enough to produce a statistically significant enhancement in GABAB activity in all brain regions, but RacBHFF combined with baclofen does. High concentrations of RacBHFF (100 and 300 µM) led to the complete inactivation of the receptors with G-protein coupling levels falling below non-specific binding levels, thus indicating tolerance. This was noticed in both of the sexes, as well as both of the species, indicating high system stability. Furthermore, there were no statistically significant differences between the species, and only minor regional statistically significant differences between the sexes. Comparing the regional baclofen-stimulated GABAB receptor-mediated G-protein activation between the two rat models showed that there are slight statistically significant differences, most of which are present in the nucleus accumbens, a part of the mesolimbic dopamine reward pathway. In addition, continuous 7-day infusions of a moderate dose (4 mg/kg) of nalmefene produced the greatest statistically significant enhancement of receptor stimulation by RacBHFF and baclofen when compared to the saline-treated samples. Seven daily injections of the same dose of nalmefene also produced statistically significant RacBHFF and baclofen-stimulated GABAB receptor activation in the amygdala and medial habenular nucleus. Therefore, a moderate dose of nalmefene (either as a continuous infusion or repeated injections) seems to produce the greatest overall enhancement of RacBHFF-induced stimulation of GABAB receptors. In conclusion, our results reveal that depending on the concentration of RacBHFF and the location of the receptors, RacBHFF differs in its efficacy to GABAB receptors in both wildtype and treated animal models. Furthermore, our results provide the first preclinical evidence that in the presence of opioid receptor tolerance, the GABAB receptor remains rather unaltered although the signal transductions of opioid and GABAB receptors are identical. This suggests that a combinational therapy of the GABAB receptor PAMs with a mu-opioid antagonist may potentially enhance the anti-craving, anti-alcohol-consuming habits of alcohol-addicted individuals.
-
(2017)Tyypin 2 diabeteksen lääkehoidossa käytettäviin inkretiimimimeetteihin, GLP-1-analogeihin ja DPP-4-estäjiin, on liitetty sydän- ja verisuonisairauksien riskitekijöiltä suojaavien vaikutusten lisäksi suoria vaikutuksia kammioiden sydänlihaksiin ja -toimintaan. Kuitenkaan varmuutta GLP-1-reseptorin ilmenemisestä sydämessä ei ole oikeaa eteiskorvaketta lukuun ottamatta. Tutkimuksessa selvitetään PCR-menetelmän avulla GLP-1-reseptorin ilmenemistä sydämen eri osissa ja sydäninfarktin ja diabeteksen vaikutusta reseptoripitoisuuksiin. Tulokset näyttäisivät tukevan tutkimustietoa, jonka mukaan terveillä GLP-1-reseptoria ilmenee sydämen eteiskorvakkeissa, muttei juurikaan kammioissa. Diabetesta sairastavassa rottamallissa GLP-1-reseptorin ilmeneminen on kauttaaltaan lisääntynyt, mutta vajaatoimintainen sydän sydäninfarktin jälkeen ei ilmennä reseptoria enempää kuin terve kudos.
-
(2015)Glukokortikoidit ovat steroidihormoneja, jotka säätelevät laajalti elimistön monia fysiologisia tapahtumia. Ne ovat keskeisiä myös tulehduksien ja autoimmuunisairauksien lääkehoidossa. Lisämunuaisia on perinteisesti pidetty elimistön ainoana glukokortikoidien tuottajana, mutta viimeaikaiset tutkimukset osoittavat niiden synteesiä tapahtuvan myös paikallisesti mm. ruuansulatuskanavassa – eniten ohutsuolessa – sekä kateenkorvassa, ihossa, keuhkoissa, verisuonissa ja keskushermostossa. Suoliston glukokortikoidituoton säätely eroaa merkittävästi lisämunuaisissa tapahtuvasta. Suoliston tuottamat glukokortikoidit säätelevät paikallista immuunipuolustusta ja tulehdusreaktiota, millä saattaa olla yhteys tulehduksellisten suolistosairauksien, kuten Crohnin taudin ja haavaisen paksusuolentulehduksen, patologisiin mekanismeihin. Glukokortikoidit saattavat vaikuttaa myös paksusuolen syövän kehitykseen. Tutkimusryhmämme selvitti koe-eläimillä (hiiri) kortikosteronituottoa ruuansulatuskanavan eri osissa jatkotutkimuksia varten.
-
(2017)Cardiovascular disease is one of the leading causes of mortality worldwide. Upon myocardial infarction, billions of cardiomyocytes are lost, a fibrotic scar forms, and the heart's contractile function is compromised. Mammalian cardiomyocytes lose most of their proliferative capacity shortly after birth. This decline in proliferative capacity is associated with a switch from glycolysis to oxidative phosphorylation, yielding more ATP, but also inevitably forming reactive oxygen species (ROS). Therefore, finding a way to extend the proliferative window seems crucial to cardiac repair. microRNAs (miRNAs) are short, single-stranded noncoding RNAs that repress gene expression after transcription by binding to their target mRNAs. SIRT1-7, mammalian homologs of the Sirt2 protein in yeast, have been implicated in the regulation of metabolic homeostasis, cell proliferation, cardiac hypertrophy, and aging. The objective of our research was to investigate the differential expression of SIRT1-7 between day 1 and day 7 neonatal mice. Since cells continue to divide until day 7, we wanted to compare the differences in sirtuin expression during the two time points. By doing so, we hoped to gain insight into ways we could regulate sirtuin protein expression by manipulating miRNA and sirtuin gene expression in diseased hearts, thereby promoting the fetal gene program and inducing cells to reenter the cell cycle. Proteins were isolated from whole cell lysates of cardiac tissue of day 1 and day 7 neonatal mice, and western blotting technique was used to analyze SIRT1-7 expression. Expression of SIRT3 and 7 was significantly higher in day 7 as opposed to day 1 in at least two of the three runs, with SIRT7 levels being higher in day 7 in all three runs. Our study provides a basis for carrying out more quantitative analysis to validate gene and protein expression and protein activity, since expression is different at the gene and protein levels and does not necessarily translate into activity.
-
(2016)Glutamatergisen hermosolutoiminnan häiriöt vaikuttavat olevan yhteydessä mielenterveys- ja mielialahäiriöihin. Metabotrooppiset glutamaattireseptorit ovat yksi mahdollinen kohde kun etsitään nykyisiä lääkkeitä tehokkaampia vaihtoehtoja näiden sairauksien hoitoon. Hiirten marmorikuulien hautaamiskokeen ajatellaan mittaavan hiirten ahdistuneisuutta ja pakko-oireisuutta, ja metabotrooppisen glutamaatti-2/3-reseptorin antagonisti LY-341495:llä on aikaisemmissa tutkimuksissa havaittu hautaamiskäyttäytymistä lievittäviä vaikutuksia tässä testissä. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli havainnoida LY-341495:n jo tunnettuja vaikutuksia hiirten käyttäytymiseen marmorikuulien hautaamiskokeessa ja selvittää, ovatko vaikutukset riippuvaisia mGlu3-reseptoreista. Lisäksi tutkimme LY-341495:n vaikutusta hiirten liikeaktiivisuuteen ja sitä, onko vaikutus samanlainen mGlu3R-poistogeenisillä hiirillä kuin villityyppi-hiirillä. Emme havainneet LY-341495:llä olevan vaikutusta villityyppi-hiirten marmorikuulien hautaamiskäyttäytymiseen tai liikeaktiivisuuteen. LY-341495 ei vaikuttanut myöskään mGlu3R-poistogeenisten hiirten marmorikuulien hautaamiskäyttäytymiseen. Havaitsimme kuitenkin LY-341495:llä olevan tilastollisesti merkittävä mGlu3R-poistogeenisten hiirten liikeaktiivisuutta lisäävä vaikutus. mGlu2-reseptorin toiminnan estyminen mGlu3-reseptorin suhteen poistogeenisillä hiirillä näyttää johtavan yliaktiivisuuteen. Pystyynnousu-aktiivisuuden lisääntymisestä ei kuitenkaan voi päätellä LY-341495:n vaikutusta mielialaan. Tuloksemme eivät tukeneet sitä, että LY-341495:n vaikutus villityyppi- tai mGlu3R-poistogeenisiin hiiriin olisi pakko-oireisuutta lievittävä.
-
(2016)The main purpose of this study was to participate in setting up the In situ hybridization for microRNA detection at the Department of Pharmacology. In situ hybridization (ISH) is an effective method for detection of molecules like DNA and RNA from paraffin fixed tissue sections. ISH provides information of expression and location of selected target molecules. Challenges of ISH for miRNA are the small size of the miRNAs and requirement of RNase free environment to prevent contamination. Micro-RNAs are single-stranded, noncoding, 19 to 25 nucleotides long RNAs, involved in post-transcriptional gene silencing. MiRNA-1 is known to be upregulated in ischemic heart muscle, which increases arrhythmias and apoptosis in heart. Adminstration of isoprenaline to Wistar rats induces similar conditions as acute myocardial infarction, which leads to rise in mir-1 levels. By in situ hybridization we were able to detect mir-1 from heart tissue and adjust suitable conditions for ISH.
-
(2016)Opioidien antinosiseptiivista vaikutusta on hyödynnetty pitkään kivun lievityksessä. Opioidien pitkäaikaiskäyttöä haittaa niille kehittyvä toleranssi. Uusimpien tutkimusten mukaan keskushermoston tukisoluilla, gliasoluilla, saattaa olla osuutensa toleranssin kehittymisessä. Eri opioidien välillä saattaa myös olla eroja toleranssin kehittymisessä. Tässä tutkimuksessa verrattiin kolmelle eri opioidille kehittyvää antinosiseptiivista toleranssia. Tutkimuksessa selvitettiin myös kroonisen opioidikäsittelyn aiheuttamaa gliasolujen aktivaatiota rottien aivoalueilla. Lisäksi tutkittiin lipopolysakkaridin vaikutusta morfiinitoleranssin kehittymiseen ja glia-aktivaatioon. Tutkimuksessa rotille muodostettiin opioiditoleranssit (morfiini, oksikodoni ja metadoni) 9 vuorokauden aikana. Lisäksi yhdelle ryhmälle annettiin lipopolysakkaridiesikäsittely. Opioidien aiheuttamaa antinosiseptiota mitattiin toleranssikäsittelyä ennen ja sen jälkeen. Rottien aivoista tehtiin mikroskooppileikkeet kolmesta eri aivoalueesta, joista tutkittiin mikroglia- sekä astrosyyttiaktivaatiota kolmella eri merkkiaineella (IBA1, OX-42 ja GFAP). Antinosiseptiokokeiden perusteella morfiinitoleranssi kehittyi nopeimmin ja oksikodonitoleranssi hitaimmin. Glia-aktivaatiossa ei nähty eroja eri opioidikäsittelyjen välillä.
-
(2016)This study compared proliferation rate and expression of cardiac stem cell markers in one day seven days old mice hearts (1D and 7D). Primary antibodies Ki-67 and C-kit were used in immunohistochemistry and primers C-kit, GATA-4, Myh6, Sca-1 and Mesp1 were used in quantitative PCR. This study found a considerably higher proliferation rate and a higher number of C-kit+ stem cells in 1D than in 7D samples, but the difference was not statistically significant due to a small sample size. A significant difference in the expression of other studied markers was not found. These findings suggest that a decrease in proliferation rate and the number of C-kit+ stem cells coincide with the loss of regenerative potential. Therefore, it is possible that either, or both, of these changes are responsible for the closure of the regenerative window.
-
(2016)Tutkimus on kirjallisuuskatsaus, jossa on selvitetty parantaako päätöksentuki (clinical decision support system, CDSS) eli tietokoneavusteinen tietojärjestelmä kliinistä päätöksentekoa, ja miten se vaikuttaa kustannuksiin, sairastavuuteen, kuolleisuuteen ja lääkäri-potilasvuorovaikutussuhteeseen. Lisäksi tutkimus selvittää, mitkä tekijät parantavat ja mitkä heikentävät päätöksentuen vaikuttavuutta. Päätöksentuki vähentää sairastavuutta, saattaa vähentää kustannuksia, vähentää lääkitysvirheitä mutta ei vaikuta kuolleisuuteen. Päätöksentuesta välittyvä hyöty potilaille on vähäistä. Päätöksentuen vaikuttavuutta parantavat tekijät, jotka helpottavat kliinikon työskentelyä. Näitä ovat käyttäjien automaattinen kehottaminen päätöksentuen käyttöön, valmiiden hoitosuositusten ehdottaminen pelkkien arviointien sijaan, automaattinen päätöksentuki kliinisen työn aikana, päätöksentuki päätöksenteon hetkellä ja tietokoneavusteinen päätöksentuki. Päätöksentuen vaikuttavuutta heikentää hälytysuupumus, jota voi vähentää poistamalla kliinisesti merkityksettömät lääkeyhteisvaikutusvaroitukset. Tulevaisuudessa tarvitaan vielä lisää tietoa päätöksenteon vaikuttavuudesta etenkin kuolleisuuteen ja kustannuksiin.
-
(2017)Denna studie är en del av ett större projekt där man strävar efter att utveckla nya mikroRNA- riktade terapier för hjärtats regeneration. Studien utreder ifall man kan se en ökning i proliferationen av kardiomyocyter efter en induce- rad hjärtinfarkt. Den centrala frågeställningen är ifall neonatalmöss med inducerad hjärtinfarkt under dag 1 uppvisar bättre regenerationsförmåga av hjärtvävnaden än neonatalmöss med indu- cerad infarkt under dag 7. Infarkterna inducerades kirurgiskt genom att ligera LAD-kranskärlet med ett stygn. Till studien användes också referensgrupper med möss utan infarkt, som vid 1 eller 7 dagars ålder genomgått en kirurgisk öppning och slutning av bröstkorgen. Hjärtana avlägsnades 21 dagar efter ingreppen och frystes ner i tissue-TEK gel med hjälp av isopentan, varefter de snittades och markerades med antikroppar mot troponin I och mot Ki-67, ett protein som förekommer i prolifererande celler. Sedan användes fluorecerande sekundäranti- kroppar och färgen DAPI för att markera proverna immunohistokemsikt. Studiens andra mål var att få markeringen att fungera, en förutsättning för att kunna räkna andelen prolifererande kar- diomyocytkärnor. I beräkningen av kardiomyocytkärnor användes ett Matlab-baserat program, Nuquantus. Där- med utreder studien även möjligheterna för automatiserad beräkning av cellkärnor. Programmet lyckades räkna mängden kardiomyocytkärnor men de prolifererande kardiomyocytkärnorna var man tvungen att räkna skiljt för hand. Andelen prolifererande kardiomyocytkärnor jämfördes till slut mellan mössen med infarkter och deras referensgrupper. I studien upptäcktes en signifikant skillnad i den naturliga regenerationsförmågan hos mössen med infarkt under dag 1 och deras referensgrupp. Ingen signifikant skillnad kunde konstateras mellan mössen med infarkt under dag 7 och den andra referensgruppen. Detta indikerar att det neonatala mushjärtat innehar potential för vidare regenerativ forskning, även för det större pro- jektet och stöder tanken att hjärtats naturliga regenerationsförmåga avtar fort efter födseln. (275 ord)
-
(2011)γ-Aminobutyric acid type A (GABAA) receptors are ligand gated ion channels mediating most inhibitory signals in the brain. GABAA receptor consists of five subunits, and there are 16 different subunits known. This forms base to pharmacological diversity of GABAA receptors. In this study autoradiography on subunit gene knock out mouse models was used to visualize the meaning of different subunits in forming GABAA receptors exhibiting special kinds of pharmacology, ie. GABA-insensitive [35S]TBPS-binding and high-affinity [3H]muscimol binding. In receptors exhibiting GABA-insensitive TBPS-binding GABA fails to cause full dissociation of TBPS from the ionophore, which means that the receptors are not fully activated by GABA. This study revealed, that contrary to what was previously believed, the forebrain GABA-insensitive [35S]TBPS binding is most likely caused by GABAA receptors consisting of α1 and β subunits or α1, β and δ subunits. High-affinity muscimol binding in the α1 KO mice was found to be unaltered, whereas α4 KO, δ KO and α4 + δ KO mice exhibited diminished high-affinity [3H]muscimol binding. Contrary to what was previously considered, this study points out that α1β GABAA receptors are mediating GIS-binding in the forebrain. Changes in high-affinity [3H]muscimol binding has also been found to correlate with changes of muscimols effects in vivo in knock out mouse models.
-
(2016)Luuytimen stromaalisista soluista (bone marrow stromal cells, BMSCs) on saatu lupaavaa näyttöä akuutin munuaisvaurion hoidossa. Reniini-angiotensiini-järjestelmä (reninangiotensin system, RAS) säätelee BMSC-solujen kypsymistä luuytimessä, joten sen häiriöt voivat heijastua muutoksina BMSC-solujen terapeuttisessa potentiaalissa. Tutkimme kaksoistransgeenisten rottien luuytimen stromaalisia kantasoluja (transgenic bone marrow stromal cells, TG-BMSCs) rotan akuutin munuaisvaurion hoidossa. Kaksoistransgeeniset rotat ilmentävät ihmisen angiotensinogeeniä ja ihmisen reniiniä, ja ne mallintavat jatkuvaa RAS-aktivaatiota. Vertailussa käytettiin tavallisten Sprague Dawley -rottien luuytimen kantasoluja (SD-BMSCs). SD-rottien akuutti munuaisvaurio saatiin aikaan iskemia-reperfuusio-menetelmällä. Immunohistokemiassa tarkasteltiin munuaisten inflammaation vaikeusastetta ED-1-markkerin avulla. Rottien seerumin urea- ja kreatiniinipitoisuudet mitattiin. Munuaiskudoksen nekroosin astetta arvioitiin histologisesti. BMSC-solujen happiradikaalien tuotantoa ja mitokondriaalista respiraatiota havainnoitiin. Mikroarraylla tutkittiin solujen geeniekspression muutoksia. Tutkimuksessa havaittiin poikkeavuuksia TG-BMSC-soluissa. Solut olivat fenotyypiltään proinflammatorisia ja niiden mitokondriot olivat dysfunktionaalisia. AKI:n yhteydessä annosteltuna solut pahensivat vauriota ja aiheuttivat merkittävää kuolleisuutta. Tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että BMSC-solujen altistuminen jatkuvalle RASaktivaatiolle voi aiheuttaa niissä pysyviä muutoksia ja huonontaa niiden terapeuttista tehoa dramaattisestikin.
-
(2014)Reniini-angiotensiinijärjestelmän (RAS) merkitys verenpaineen säätelyssä on kiistaton. Sen komponenttien on osoitettu ilmentyvän sydämen ja verenkiertoelimistön lisäksi myös muun muassa ruoansulatuskanavassa, haimassa, aivoissa ja silmissä, mikä on herättänyt ajatuksen siitä, että RAS:n merkitys elimistön toiminnalle voi olla huomattavasti nykykäsitystä monimuotoisempi. Ruoansulatuskanavassa sen vaikutuksia voivat olla verisuonten ja suolen sileän lihaskudoksen supistuksen säätely, muutokset suolen limakalvon läpäisevyydessä tai toimiminen ruoansulatusentsyyminä.
-
(2016)The purpose of this study is to assess if it is possible to reprogram cardiomyocytes from mouse embryonic fibroblasts by using one transgenic factor, Oct4, and a pool of small molecules added to growth medium. The Oct4 gene was conducted in mouse embryonic fibroblasts by lentiviral vectors. Samples were taken for analysis after 15, 20 and 41 days of growing the fibroblasts with small molecules. Compared to control group, no upregulation of cardiac progenitor or cardiomyocyte specific genes were observed. Concentration of Ctgf decreased in treatment cells compared to control cells, which implies that control cells continued functioning as fibroblasts more than treatment cells. The cell morphology of treatment cells changed in the direction of cardiomyocytes compared to control cells; more cylinder-like and branching compared to spindle-like fibroblasts. A different approach was also attempted, the STAP (Stimulus-Triggered Acquisition of Pluripotency) method, in which fibroblasts are exposed to acid treatment while growing. The pluripotent mRNA expression did not rise in this analysis.
-
(2011)Lihavuus on kasvava ongelma länsimaissa. Siihen liittyy useita metabolisia muutoksia, jotka johtavat erilaisiin kohde-elinvaurioihin. Vaurioiden mekanismien tunnistaminen on tärkeää, jotta niiden ehkäisyyn voidaan kehittää uusia elintapa- ja lääkehoitoja. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää ravinnon rasvamäärän, resveratrolin ja kalorirajoituksen vaikutuksia hiirten sydämissä ja maksoissa sekä määrittää näiden vaikutus SIRT1 – proteiinin määrään kyseisissä kudoksissa. Tutkimuksessa vertailtiin Western Blot – menetelmän avulla SIRT1:n pitoisuutta hiirten sydämissä ja maksoissa. SIRT1:n lokalisaatio osoitettiin immunohistokemiallisen värjäyksen avulla. Sydänlihassolujen hypertrofiaa arvioitiin mikroskoopin avulla HE – värjätyistä leikkeistä. Resveratrolin vaikutus sydänlihassolujen hypertrofian asteeseen jäi vähäiseksi. Kalorirajoitus lisäsi SIRT1:n määrää sekä sydämessä että maksassa ja esti sydänlihassolujen hypertrofian. Tutkimus tarjoaa hyvän pohjan selvittää laajemmin resveratrolin vaikutusta SIRT1:n aktivaatioon ja sitä kohde-elinvaurioiden estoon.
-
(2016)Tutkielmassa perehdytään soluterapioiden käyttöön palovammojen hoidossa. Siihen kuuluvat kirjallisuuskatsaus sekä kokeellinen osa kahden biomateriaalin vertailusta laboratorio-olosuhteissa. Tarkasteltavia menetelmiä ovat ihmisen viljellyt ja viljelemättömät autologiset ja allogeeniset keratinosyytit, ihosiirteet, eläinperäiset ihon korvikkeet sekä ihon korvikkeina käytettävät biomateriaalit. Kutakin menetelmää on käytetty maailmalla kliinisissä tutkimuksissa jo usean vuosikymmenen ajan, mutta läpimurto tekniikoiden osalta edelleen puuttuu. Saadut tulokset ovat osaltaan ristiriidassa keskenään ja lisäksi tutkimusten potilasaineistot ovat vaihtelevia ja pieniä. Menetelmien osalta tarvittaisiin vielä lisätutkimuksia erityisesti niiden teknisestä toteuttamisesta ja hoidon pitkäaikaistuloksista. Parhaimmillaan ne ovat kuitenkin mahdollisuus osana henkeä pelastavaa hoitoa erityisesti laajoissa ja hankalissa palovammoissa.
Now showing items 1-20 of 22