Skip to main content
Login | Suomeksi | På svenska | In English

Browsing by Subject "sytokromi P450"

Sort by: Order: Results:

  • An Automated Cocktail Method for In Vitro Assessment of Direct and Time-Dependent Inhibition of Nine Major Cytochrome P450 Enzymes : Application to Testing CYP2C8 Inhibitor Selectivity 
    Aurinsalo, Laura (2020)
    Lääkeaineyhteisvaikutukset ovat merkittävä lääkehoidon ongelma. Osa lääkeaineista kykenee aiheuttamaan ajasta riippuvaksi inhibitioksi kutsutun pitkäkestoisen estovaikutuksen lääkeainemetabolian kannalta keskeisiin sytokromi P450 (CYP) –entsyymeihin, mikä huomioidaan usein puutteellisesti lääkekehityksessä. Tavoitteenamme oli kehittää automatisoitu ajasta riippuvan estovaikutuksen seulontaan optimoitu yhdeksän keskeisintä ihmisen CYP-entsyymiä kattava cocktail-menetelmä ja määrittää sen avulla gemfibrotsiilin ja klopidogreelin glukuronidimetaboliittien CYP2C8-estovaikutusten selektiivisyydet. In vitro -inkubaatiot selektiivisesti tietyn CYP-entsyymin kautta metaboloituvilla substraateilla ja ihmisperäisellä maksamikrosomiseoksella tehtiin 96-kuoppalevyillä automatisoidulla robottitekniikalla. Muodostuneiden metaboliittien pitoisuudet mitattiin nestekromatografia-massaspektrometrialla. Cocktailin sisäisten lääkeaineyhteisvaikutusten minimoimiseksi lääkeaineet jaettiin cocktaileihin I (takriini/CYP1A2, bupropioni/CYP2B6, amodiakiini/CYP2C8, tolbutamidi/CYP2C9 ja midatsolaami/CYP3A4) ja II (kumariini/CYP2A6, S-mefenytoiini/CYP2C19, dekstrometorfaani/CYP2D6 ja astemitsoli/CYP2J2) yhteisvaikutustestauksen perusteella. Substraattipitoisuudet valittiin Km-määritysten tuloksia vastaaviksi. Menetelmän toimivuus varmistettiin tunnettujen malli-inhibiittoreiden avulla (furafylliini/CYP1A2, selegiliini/CYP2A6, klopidogreeli/CYP2B6, gemfibrotsiilin 1-O-β- glukuronidi/CYP2C8, tieniilihappo/CYP2C9, tiklopidiini/CYP2C19, paroksetiini/CYP2D6, terfenadiini/CYP2J2 ja ritonaviiri/CYP3A4), jolloin havaittiin yhden substraatin – ja cocktail –menetelmän tuottamien IC50-arvojen vastaavan toisiaan. Gemfibrotsiilin 1-O-β-glukuronidi ja klopidogreelin asyyli-β-D-glukuronidi olivat CYP2C8-selektiivisiä inhibiittoreita ≤300 μM –pitoisuuksilla ja gemfibrotsiilin 1-O-β-glukuronidilla ero CYP2C8:n ja muiden entsyymien eston voimakkuuden välillä oli 100-kertainen. Ajasta riippuvan inhibition havaitsemiseen optimoitu automatisoitu herkkä yhdeksän keskeisintä ihmisen CYPentsyymiä kattava seulontamenetelmä kehitettiin onnistuneesti. Menetelmää käyttämällä havaittiin gemfibrotsiilin 1-O- β-glukuronidin soveltuvan diagnostiseksi in vitro CYP2C8-inhibiittoriksi 60-300 μM –pitoisuuksilla.
  • CYP2C19 Inhibition Lasts for more than 72 Hours after High-Dose Esomeprazole : Estimation of CYP2C19 Half-Life Using Pantoprazole as an in Vivo Probe 
    Kaartinen, Taavi (2018)
    In vitro studies have shown that esomeprazole, the S-isomer of omeprazole, is a metabolism dependent inhibitor (MDI) of cytochrome P450 2C19, an essential drug-metabolizing enzyme. In this study, we characterized the effects of esomeprazole in vivo on CYP2C19, 3A4, and 1A2 using pantoprazole, midazolam, and caffeine, respectively, as probe drugs. In addition, we estimated the half-life of CYP2C19 by observing its recovering activity after inhibition. In a 5-phase study 10 healthy volunteers were administered 20 mg pantoprazole, 50 mg caffeine and 0.5 mg midazolam before and 1, 25, 49 and 73 hours after a 7 day pretreatment with 80mg esomeprazole twice daily. Esomeprazole increased the (R)-pantoprazole’s exposure up to 5-fold and the significant increase lasted at least 72 hours, which suggests strong MDI of CYP2C19. Esomeprazole had a minor effect on CYP3A4 and no effect on CYP1A2. The turnover half-life of CYP2C19 was estimated to be 46 hours. This estimation will be useful in the future for in vitro-in vivo extrapolations and physiologically based pharmacokinetic modeling of CYP2C19. Concomitant use of drugs metabolized by CYP2C19 should be considered cautiously because of the clinically relevant strong and prolonged inhibition of CYP2C19 by esomeprazole. Alterations in exposures to drugs metabolized by CYP2C19 are expected after discontinuation of esomeprazole treatment for at least 3-4 days.

Yhteystiedot

HELSINGIN YLIOPISTO